MECC-DAD和HPLC-FLD测定牛乳中5种黄曲霉毒素的方法比较研究
Journal of Dairy Science and Technology(2020)
Abstract
建立高效胶束电动毛细管色谱耦合二极管阵列检测器(micellar electrokinetic capillary chromatography-diode array detector,MECC-DAD)检测牛乳中痕量黄曲霉毒素的新方法,采用高效液相色谱-荧光检测器(high performance liquid chromatography-fluorescence detector,HPLC-FLD)法及MECC-DAD法检测牛乳样品中5种黄曲霉毒素的残留量,考察2种检测技术的特异性.牛乳样品经免疫亲和柱净化后,MECC-DAD法采用未涂层熔融石英毛细管柱进行分离,以7.5?mmol/L四硼酸钠、30?mmol/L十二烷基磺酸钠及体积分数5%乙腈体积比1:1:1的混合液(pH?8.5)为缓冲液,检测波长为214?nm;HPLC-FLD法采用C18柱(150?mm×4.6?mm,5?μm)进行分离,乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,荧光检测器激发波长360?nm、发射波长440?nm.结果表明:MECC-DAD法的色谱图峰形更对称、平滑、尖锐,无拖尾现象;MECC-DAD和HPLC-FLD法的检出限分别为0.182~1.669、0.014~0.058?μg/L,MECC-DAD法的检出限虽高于HPLC-FLD法,但也能满足牛乳中黄曲霉毒素的测定要求;HPLC-FLD法的精密度稍高于MECC-DAD法;MECC-DAD法的加标回收率为80.3%~137.0%,HPLC-FLD法的加标回收率为79.6%~134.0%,二者相当;2种方法对市售牛乳样品的定量检测结果偏差为P=0.900>0.05,没有显著性差异.MECC-DAD法分离快速、高效、经济,更适合牛乳样品中黄曲霉毒素残留量的检测.
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