家蝇几丁质结合蛋白(Md -CBPⅠ)的表达纯化及活性分析

Chinese Journal of Veterinary Drug(2016)

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摘要
为了研究家蝇几丁质结合蛋白(Md -CBPⅠ)在家蝇防御体系中的相关活性,采用 PCR技术,对从鸡源沙门氏菌诱导家蝇幼虫构建的抑制性消减文库(SSH)中筛选到的家蝇幼虫几丁质结合蛋白Ⅰ基因(Musca domestica chitin binding proteinⅠ,Md -CBPⅠ)进行扩增,并成功构建了重组表达质粒 pET -32a -Md -CBPⅠ,于大肠杆菌 BL21(DE3)中得以高效表达,纯化并获得了 Md -CBPⅠ融合蛋白。进一步对该蛋白的亲和活性进行了研究,发现 Md -CBPⅠ融合蛋白对几丁质以及纤维素均有一定的结合作用,且其对几丁质的结合作用相对较好。试验为家蝇几丁质结合蛋白生物学活性和免疫学活性的研究奠定了基础。
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