微小核糖核酸miR-449a通过凋亡及细胞周期对结直肠癌转移癌细胞LOVO的影响

目的 探究微小RNA(miRNA-449a)在结直肠癌转移癌中的表达及其对结直肠癌细胞的凋亡及细胞周期的影响.方法 对结直肠癌细胞系作不同处理:模拟物阴性对照组、模拟物组、抑制物阴性对照组、抑制物、空白组.采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测结直肠癌转移细胞中的miRNA-449a表达;Tunel法测定不同转染组细胞凋亡情况;流式细胞术测定不同转染组细胞中细胞周期情况;Wstern blot检测各处理组细胞中凋亡相关蛋白BCL-2、BAX及Capase-3的表达.结果 miR-449a信使RNA水平在结直肠癌转移癌细胞系LOVO及HCT15、HT29、SW480中较人结肠黏膜上皮细胞系NCM460中表达也明显下调,差异有统计学意义(P<0.05);与空白组、上调NC组比较,上调组的miR-449a mRNA的相对表达量升高,与空白组、下调NC组比较,上调组的miR-449a mRNA的相对表达量下降(P均<0.05);Tunel法检测细胞凋亡显示与上调NC组、空白组相比,上调组的结直肠癌细胞明显凋亡增加(P<0.01).流式细胞术检测细胞周期结果 显示与空白组、上调NC组比较,上调组细胞周期中G0 /G1期细胞所占百分比升高(P均<0.05);Western blot检测结果 验证了不同处理组LOVO和SW480细胞中, BCL-2蛋白表达下降,而BAX及Capase-3表达上调,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 miRNA-449a可能通过下调Bcl-2蛋白的表达,发挥诱导结直肠癌细胞凋亡的作用.