HSPB8对糖尿病神经元的保护性作用及机制研究

目的 观察HSPB8在自发性2型糖尿病db/db小鼠脊髓组织中的表达,探讨HSPB8发挥神经保护性作用的机制.方法 选择8周龄,雄性,db/m小鼠(db/m组),糖尿病db/db小鼠(db/db组),各10只.动态观察体重、空腹血糖;HE染色观察小鼠脊髓组织损伤情况;qRT-PCR检测HSPB8、Caspase-1、IL-18、P62和LC3基因mR-NA表达;Western blotting检测HSPB8、Caspase-1、IL-18、P62和LC3蛋白表达.分别用11、25、30和35 mmol/L葡萄糖浓度刺激RGC-5细胞48 h为糖尿病体外模型,Western blotting检测HSPB8、Caspase-1、IL-18、LC3和P62蛋白表达.RGC-5细胞沉默HSPB8蛋白,高糖(35 mmol/L)刺激48 h,Western blotting检测HSPB8、Caspase-1、IL-18、LC3和P62蛋白表达.组间比较采用成组t检验和单因素方差分析.结果 ①HE染色结果表明db/db小鼠脊髓组织出现损伤;②qRT-PCR结果表明HSPB8、Caspase-1、IL-18、P62和LC3基因均在糖尿病脊髓组织中表达;③Western blotting结果表明,与db/m组小鼠相比,db/db小鼠受损脊髓组织中HSPB8、LC3-Ⅱ表达下降,Caspase-1、IL-18和P62表达均升高(均P＜0.05);不同浓度高糖刺激后,随着血糖浓度升高,HSPB8、LC3-Ⅱ表达下降,Caspase-1、IL-18和P62表达升高(均P＜0.05);④RGC-5细胞HSPB8沉默后高糖刺激48 h,Caspase-1、IL-18和P62蛋白表达均升高而LC3-Ⅱ表达下降(均P＜0.05).结论 HSPB8在糖尿病神经病变中发挥重要保护性作用,其机制可能与HSPB8影响神经细胞中的炎性因子及自噬过程相关.