黄芪甲苷抑制高糖腹透液诱导 HMrSV5氧化应激与EMT 的实验研究

目的：观察黄芪甲苷(Astragaloside Ⅳ,AS-Ⅳ)对高糖腹透液诱导人腹膜间皮细胞 HMrSV5氧化应激及 EMT 的影响,探讨 ROS 在 EMT 中的作用及 AS-Ⅳ干预机制。方法采用葡萄糖腹透液诱导建立 HMrSV5氧化应激模型,相差显微镜观察细胞形态变化,MTT 检测 AS-Ⅳ及葡萄糖腹透液对细胞活力的影响；予40μg/mL AS-Ⅳ干预 HMrSV5氧化应激,DHE 荧光探针检测药物作用前后 ROS 生成水平变化,Western blot 检测 EMT 相关蛋白变化；与 ROS 清除剂 NAC 作对照,观察 AS-Ⅳ干预 HMrSV5氧化应激 EMT 指标及 Smads 蛋白的变化。结果①40、50μg/mL AS-Ⅳ干预后细胞活力稍有上升(P <0.05)；随腹透液作用时间的延长及葡萄糖浓度提高,细胞活力明显抑制,以4.25%高糖腹透液干预48 h 最明显(P <0.05),细胞拉伸变长；②40μg/mL AS-Ⅳ作用细胞能抑制形态改变,降低模型组 ROS 的生成(P <0.05),上调 E-cadherin、ZO-1表达,下调α-SMA 表达,并抑制 Smad2/3磷酸化；③5 mmol/L NAC 产生类似调控作用。结论高糖腹透液可抑制 PMCs 细胞活性,增加 ROS 生成,导致 PMCs EMT,其分子机制可能与 ROS 参与调控的 Smads 通路激活有关,而 AS-Ⅳ可能通过减少 ROS生成,抑制 Smad2/3磷酸化,阻抑 PMCs EMT。