金枪鱼骨胶原蛋白肽螯合钙制备工艺及对MG-63细胞碱性磷酸酶分泌的影响

目的 获得1种能够增加人成骨细胞碱性磷酸酶生成量的金枪鱼骨胶原蛋白肽螯合钙(collagen peptide from tuna bone chelated calcium,TCP-Ca)的工艺方法.方法 利用正交实验优化蛋白酶酶解法制备金枪鱼骨胶原蛋白肽的工艺,利用正交实验优化金枪鱼骨胶原蛋白肽和柠檬酸钙进行螯合反应的工艺,然后利用傅里叶变换红外光谱对TCP-Ca进行定性分析,同时检测TCP-Ca对MG-63细胞碱性磷酸酶生成量的影响.结果 金枪鱼骨胶原蛋白肽制备的最佳工艺为pH 9.0、酶解时间180 min、加酶量5 000 U/g、酶解温度45℃;TCP-Ca制备的最佳工艺为温度35℃、pH7.5、肽钙质量比6∶1、时间40 min;金枪鱼骨胶原蛋白肽的氨基和羟基均参与了钙螯合反应;TCP-Ca比金枪鱼骨胶原蛋白肽更有利于增加MG-63细胞分泌碱性磷酸酶.结论 本文优化了TCP-Ca的制备工艺,发现其具有增加成骨细胞分泌碱性磷酸酶的生物活性.