微小RNA-410对细胞色素P4503A5基因表达水平的调控的研究

目的 研究微小RNA-410 (miRNA)对细胞色素P450 3A5(CYP3 A5)表达的特异调控.方法 用Targetscan、miRanda和Pictar等靶基因预测软件预测可能作用CYP3A5基因的miRNA,并进行统计和筛选.用HepG2细胞进行转染实验,miR-410 mimic转染组予以miR-410 mimic(类似物)转染48 h,miR-410inhibitor转染组予以miR-410 inhibitor(抑制药),空白对照组加入等量的细胞培养液转染48 h.用实时荧光聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western-blot鉴定CYP3A5 mRNA和蛋白质的表达.结果 miR-410在很大程度与CYP3A5mRNA的3'-UTR结合.与空白对照组的CYP3A5蛋白质表达水平为2.61 ±0.53相比,miR-410 mimic转染组为1.47 ±0.13,miR-410 inhibitor转染组为3.50±0.65,差异均有统计学意义(P＜0.01).miR-410 mimic转染组和miR-410 inhibitor转染组的CYP3A5 mRNA的表达水平分别为1.81 ±0.11和1.82 ±0.41,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 miR-410参与CYP3A5蛋白表达的调控,是一种转录后调控机制.