不同MEK1/2抑制剂对NF1敲低的施万细胞增殖活性的影响

目的:构建慢病毒干扰载体介导的NF1敲低RSC96(NF1kdRSC96)施万细胞株,对比不同MEK1/2抑制剂对该稳转细胞株增殖的影响.方法:运用慢病毒干扰载体构建NF1kd的施万细胞模型,采用qRT-PCR及Western免疫印迹验证慢病毒干扰载体组(NF1kd组)和空白载体组的NF1表达水平;应用5种MEK1/2抑制剂,包括司美替尼(Selumetinib)、贝美替尼(Binimetinib)、考比替尼(Cobimetinib)、曲美替尼(Trametinib)、PD0325901处理细胞,CCK-8法检测不同MEK1/2抑制剂在时间梯度和浓度梯度下的抑制作用.使用Graphpad Prism 5计算NF1kd组和空白载体组中5种抑制剂的半抑制浓度(IC50)值,采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析.结果:5种MEK1/2抑制剂均对NF1kd施万细胞的增殖有抑制作用(P＜0.05).72 h时,PD0325901、Cobimetinib和Trametinib 3种抑制剂的抑制作用显著强于Selumetinib和Binimetinib (P＜0.05).IC50实验中,Cobimetinib抑制NF1kd组及空白载体组的药物浓度分别为(2.35 ±0.98) μmol/L和(14.22±1.67) mol/L,组间差异显著(P＜0.05);Binimetinib抑制NF1kd组及空白载体组的药物浓度分别为(18.96±2.37) mol/L和(114.1±5.98) mol/L,组间差异显著(P＜0.05),而Selumetinib、Trametinib和PD0325901抑制NF1kd组及对照组的IC50值无显著差异(P＞0.05).结论:成功构建了NF1敲低的施万细胞稳转株.5种MEK1/2抑制剂均能抑制NF1kdRSC96稳转细胞株的增殖活性,PD0325901、Trametinib和Cobimetinib具有更持久的抑制作用.相同药物浓度下,Cobimetinib和Binimetinib能更特异地抑制NF1kd施万细胞的增殖活性.Cobimetinib同时具备药效持久性和抑制特异性,可能具有一定的临床应用前景.