实验性视网膜缺血-再灌注损伤中坏死性凋亡相关因子的表达变化

目的 建立视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia reperfusion injury,RIRI)模型,观察坏死性凋亡是否参与其病理过程.方法 野生型C57小鼠随机分为对照组及实验组.对照组不做任何处理,实验组采用前房灌注法建立RIRI模型,并于RIRI后1d、2d、4d、7d分别收集视网膜或眼球,行荧光定量PCR、Western blot、免疫荧光染色检测受体相互作用蛋白(receptor interacting protein,RIP)3及RIP1、白细胞介素-13、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-0、Caspase8的表达变化.结果 荧光定量PCR检测RIP3、RIP1、白细胞介素-1β、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α、Caspase8的mRNA表达,与对照组比较,实验组在不同时间点均有显著升高,差异均有统计学意义(均为P＜0.001).RIP3及RIP1表达以早期升高为主,后期逐渐下降.Westem blotting检测发现RIP3在RIRI后1d及2d显著升高,随后呈下降趋势.组织切片免疫荧光染色也发现RIP3在RIRI后1d及2d显著升高,随后呈下降趋势.结论 实验性RIRI模型中,坏死性凋亡参与了其病理过程.坏死性凋亡特异性蛋白RIP3表达以早期升高为主,后期逐渐下降.