UGCG通过调控MDR1/P-gp参与人结肠癌奥沙利铂耐药的初步研究

目的 建立人结肠癌耐奥沙利铂(L-OHP)细胞株,检测该细胞株的多药耐药性并初步探讨其可能的耐药机制.方法 以人结肠癌细胞HCT116为对象,采用药物浓度梯度递增诱导法建立人结肠癌耐奥沙利铂细胞株HCT-116/L-OHP.CCK-8法检测L-OHP、顺铂(DDP)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)对亲本细胞和耐药细胞株的半数抑制浓度(IC50).使用UDP-葡萄糖神经酰胺糖基转移酶(UGCG)siRNA转染HCT-116/L-OHP细胞,实时荧光定量PCR和Western blot检测干扰前后UGCG基因和多药耐药基因1 (MDR1) mRNA及其编码的蛋白表达水平.结果 HCT-116/L-OHP对L-OHP的耐药指数为10.5,与DDP有一定程度的交叉耐药,耐药指数为4.61,但对5-Fu无交叉耐药.耐药细胞HCT-116/L-OHP中UGCG、MDR1 mRNA和UGCG、P-糖蛋白(P-gp,MDR1编码的蛋白)表达均增加,相比HCT-116细胞,差异具有统计学意义(P＜0.05).UGCG siRNA成功抑制HCT-116/L-OHP细胞中UGCG的表达,各干扰组MDR1 mRNA、P-gp表达减少,与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 成功构建了人结肠癌耐药细胞株;UGCG基因通过调控MDR1/P-gp的表达参与人结肠癌奥沙利铂的耐药机制的形成.