XB130基因对肝细胞癌细胞增殖的影响及其机制

背景与目的:XB130蛋白在肿瘤细胞增殖和侵袭中有重要作用,但在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的研究却极少,其作用至今仍不清楚.该研究拟探讨XB130基因对HCC细胞增殖能力的影响及其可能的下游机制.方法 :采用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测HCC细胞系Huh7、HepG2、 SNU449及正常肝脏细胞系HL7702内XB130蛋白的表达.将XB130-siRNA转染Huh7细胞后,采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测Huh7细胞活性,流式细胞术检测Huh7细胞周期,Western blot检测 p-AKT、p-GSK3β、cyclin D1及p-Rb的蛋白表达水平,反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测E2F/DP-1的靶基因cyclin E1、c-Myc及PCNA的mRNA表达水平.结果 :XB130蛋白在Huh7、HepG2、SNU449和HL7702细胞中的相对表达量分别为0.66±0.10、0.78±0.11、0.83±0.08和 0.32±0.06,各HCC细胞与HL7702细胞的差异均有统计学意义(P均＜0.01).XB130-siRNA转染可成功抑制 Huh7细胞中XB130蛋白的表达.沉默XB130后,Huh7细胞活性在72 h后明显减弱(P＜0.001),48 h后G0/G1期细胞比例升高,S和G2/M期细胞比例降低(P均＜0.01),p-AKT、p-GSK3β、cyclin D1及p-Rb的蛋白表达下降 (P均＜0.01),cyclin E1、c-Myc及PCNA的mRNA表达下降(P 均＜0.001).结论 :XB130通过对细胞周期蛋白及下游转录因子的调控,影响HCC细胞增殖.