miR-153通过靶向SORBS2促进LPS诱导的心肌H9C2细胞损伤

目的:研究微小RNA-153 (miR-153)对脂多糖(LPS)诱导的胚胎大鼠心肌H9C2细胞的炎症因子、细胞活力及凋亡的影响,并探讨其机制.方法:运用LPS建立H9C2细胞损伤模型;将细胞分为anti-miR-Con组(转染anti-miR-Con)、anti-miR-153组(转染anti-miR-153)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-SORBS2组(转染pcDNASORBS2)、anti-miR-153+ si-Con组(共转染anti-miR-153和si-Con)和anti-miR-153+ si-SORBS2组(共转染anti-miR153和si-SORBS2),转染后用LPS处理.RT-qPCR法检测细胞中miR-153和SORBS2 mRNA的表达;MTT法检测细胞活力;Western blot检测细胞中SORBS2的蛋白表达;ELISA实验检测细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的含量;流式细胞术检测细胞凋亡;双萤光素酶报告基因实验验证miR-153与SORBS2的靶向关系.结果:成功构建LPS诱导的H9C2细胞损伤模型;与对照的PBS组相比,LPS处理后H9C2细胞中miR-153的表达明显升高,SORBS2的表达明显降低;敲减miR-153表达或过表达SORBS2均可减少LPS诱导的TNF-α和IL-6释放及细胞凋亡,提高细胞活力;miR-153可抑制含野生型SORBS2的H9C2细胞的萤光素酶活性;敲减SORBS2的表达可逆转抑制miR-153对LPS诱导H9C2细胞的抗炎、抗凋亡及提高细胞活力的作用.结论:miR-153可促进LPS诱导的H9C2细胞炎症因子分泌和凋亡,抑制细胞的活力,发挥促进损伤的作用,其作用机制与靶向SORBS2有关.SORBS2可能成为心肌损伤治疗的新靶点.