切应力通过Pim1/eNOS途径调节人脐静脉内皮细胞NO分泌

目的:探讨层流切应力是否可通过Pim1调节内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性,从而调节血管内皮细胞一氧化氮(NO)分泌.方法:体外原代培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),运用平行平板流动腔系统给HUVECs加载层流切应力(15 dyn/cm2).采用Western blot法检测Pim1蛋白表达及eNOS-Ser1177磷酸化水平;硝酸还原酶法检测NO分泌量;利用特异性小干扰RNA(siRNA)转染技术沉默Pim1基因后再检测上述指标的变化.结果:切应力作用HUVECs 15 min,可以显著上调Pim1蛋白表达(P＜0.05),同时显著增强eNOS-Ser1 177磷酸化水平(P＜0.05),伴随HUVECs NO分泌显著增多(P＜0.05).转染siPim1可以抑制切应力诱导的Pim1表达(P＜0.05),同时抑制eNOS-Ser1177磷酸化(P＜0.05),NO分泌随之显著降低(P＜0.05).结论:流体切应力可能通过Pim1/eNOS途径调节血管内皮细胞NO分泌.