人源抗狂犬病毒G蛋白单链抗体的表达和鉴定

CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS(2005)

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Abstract
目的对人源抗狂犬病毒G蛋白单链抗体A12进行可溶性表达及特异性和中和活性检测.方法表达人源单链抗体A12的菌株,经诱导后进行SDS-PAGE及Western blot检测,用流式细胞仪(FACS)检测表达狂犬病毒G蛋白的重组痘苗病毒感染Vero细胞的能力,用快速荧光灶抑制实验(RFFIT)检测表达产物的中和活性.结果Western blot显示表达产物与抗C-myc抗体在相对分子质量约30 000处出现强阳性表达带.FACS表明A12与表达狂犬病毒G蛋白的重组痘苗病毒感染的Vero细胞出现特异性反应.RFFIT表明,A12 ScFv在1:27倍稀释时能完全中和病毒.结论已获得了A12可溶性表达,表达产物能与狂犬病毒G蛋白特异性结合,并对狂犬病毒具有一定的中和活性.
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glycoprotein antigen,virus
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