MicroRNA-126调控CD4+Foxp3+T细胞的外周诱导及功能

目的 探讨MicroRNA-126对CD4+Foxp3+Tregs的外周诱导调控及功能的影响.方法 分选Balb/c小鼠脾脏CD4+CD25-初始T细胞,在anti-CD3/CD28的激活下,用TGF-β进行诱导培养,在第3、5天FACS检测CD4+ Foxp3+Tregs的比例,Real-time PCR检测miR-126的表达;采用miR-126抑制剂抑制miR-126后,FACS检测CD4+Foxp3+Tregs的比例,Real-time PCR检测miR-126的表达;进而采用miR-126 ASO下调CD4+Foxp3+Tregs中miR-126的表达,Real-time PCR检测IL-10和TGF-β的表达,CFSE标记技术分析CD4+Foxp3+Tregs免疫抑制功能.结果 miR-126在活化的Tregs中的表达高于在活化的CD4+CD25-T细胞中的表达(P＜ 0.05);TGF-β在体外诱导生成Foxp3+CD4+T细胞的比例组间差异具有统计学意义(P＜0.05),同时在Tregs的诱导过程中,miR-126的表达上调(P＜ 0.05);CD4+CD25-T细胞体外瞬时转染miR-126抑制剂,与对照组比较,Foxp3+CD4+T细胞的比例组间差异具有统计学意义(P＜0.05),miR-126抑制剂能有效下调miR-126的表达(P＜0.05);与对照组相比,miR-126 ASO转染组Tregs中Foxp3、CTLA-4和GITR的表达均降低(P＜0.05),且TGF-β和IL-10的mRNA相对表达均降低(P＜ 0.05);CFSE标记细胞增殖实验显示,miR-126 ASO Tregs组CD4+CD25-T细胞增殖与Tcon组、Control Tregs组比较,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 下调miR-126的表达能显著削弱CD4+Foxp3+Tregs的外周诱导和免疫抑制功能.