人体c-Mpl分子配体不同表达载体的构建及其优化表达策略
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS SUNYATSENI(2003)
Abstract
利用酵母双杂交系统从人体肝脏cDNA文库筛选到血小板生成素受体Mp1分子配体的xp1基因,构建pET-28(b)-xp1,pBV220-xp1和pBAD/gⅢA-xp1表达质粒,分别进行IPTG、温度和果糖诱导,表达产物利用小鼠巨核细胞集落形成单位测定活性.表达分析显示BL21/pET-28(b)-xp1水溶性XP1目的蛋白表达量为最高,活性最大;BL21/pBV220-xp1被短时、低温诱导后可增加表达目的蛋白的水溶性,但稳定性差,表达量和活性均不及BL21/pET-28(b)-xp1高;TOP10/pBAD/gⅢA-xp1不能分泌到细胞质周膜,以包涵体形式存在细胞内中,并且为无活性表达.
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