血管生成素-2通过整合素α5β1调控血管包绕的肿瘤细胞巢阳性肝细胞癌的癌巢转移

目的:探讨血管包绕的肿瘤细胞巢（VETC）阳性型肝细胞癌癌巢转移的分子机制。方法:收集72例肝细胞肝癌标本，通过免疫组化CD34（血管内皮细胞标记蛋白）染色观察VETC癌巢在原发灶、胆管癌栓、门静脉癌栓中的形态学表现，观察VETC癌巢血行转移的特点。利用生物信息学预测与VETC癌巢形成密切相关的分子蛋白，用免疫组化检测血管生成素-2（Ang-2）、整合素α5 （integrin α5）、整合素β1（integrin β1）及环氧合酶-2 （COX-2）蛋白在肝癌中的表达，用Transwell细胞迁移实验检测Ang-2/integrin α5β1蛋白对内皮细胞、肝癌细胞迁移能力的影响。Western印迹法检测Ang-2/integrin α5β1蛋白对黏着斑激酶（FAK）蛋白活性的影响。结果:在收集的肝癌标本中，VETC（+）肝癌27例（27/72）， 其中3例存在胆管癌栓，5例存在门静脉癌栓，3例同时存在胆管癌栓、门静脉癌栓。VETC（+）肝癌能够以癌巢的形式发生门静脉、胆管及肝内转移，并保留完整的VETC癌巢结构。Ang-2、integrin α5、integrin β1可过表达于VETC（+）肝癌癌巢的肿瘤细胞、内皮细胞；COX-2仅高表达于VETC（+）肝癌癌巢的肿瘤细胞。Ang-2可促进肝癌细胞（121±12比186±11， P<0.01）、内皮细胞的迁移（81±7比163±14， P<0.01）。整合素α5β1的激活拮抗剂ATN-161可有效降低Ang-2促肝癌细胞（185±10比135±9， P<0.05）、内皮细胞（156±14比103±6， P<0.05）的迁移能力。ATN-161可显著降低Ang-2对肝癌细胞、内皮细胞FAK蛋白的磷酸化激活。 结论:VETC（+）肝癌可以癌巢形式发生整体转移，具有特异性的调控蛋白，Ang-2/α5β1/FAK 是VETC（+）肝癌癌巢转移治疗中的潜在蛋白靶点。