慢病毒介导的N-myc下游调节基因-2对肾癌细胞株786-O增殖及细胞周期素D1、p21表达的影响

目的 观察N-myc下游调节基因-2(NDRG2)对肾癌细胞株786-O增殖及细胞周期素(Cyclin) D1、p21表达的影响.方法 以携带人NDRG2基因的慢病毒载体感染体外培养的肾癌细胞株786-O.采用间接免疫荧光实验检测慢病毒感染后细胞中NDRG2的过表达.Western blot检测Cyclin D1、p21的表达变化,通过细胞生长实验、平板克隆实验检测NDRG2对786-O细胞增殖能力的影响.流式细胞仪检测感染前后细胞的凋亡.结果 786-O细胞经慢病毒感染后NDRG2蛋白表达水平明显增加.Western blot实验显示慢病毒感染后细胞中Cyelin D1表达明显降低；而p21表达明显增加.噻唑蓝(MTT)比色(抑制率12 h为3.96％,24 h为4.78％,36 h为9.32％,48 h为20.27％,60 h为22.85％,72 h为30.86％)显示NDRG2对786-O细胞的生长有明显抑制作用.平板克隆实验(3组分别为67.1％、65.5％和41.7％)显示lenti-NDRG2组786-O细胞的克隆形成能力明显降低.流式细胞术显示lenti-NDRG2组细胞凋亡率为(17.20±1.44)％,明显高于对照组[(6.30±0.46)％,t=12.49,P＜0.01]和lenti-mCherry组[(6.00±0.31)％,t=13.17,P＜0.01].结论 通过慢病毒载体使786-O细胞表达NDRG2基因,可以明显抑制细胞的增殖,并可降低Cyclin D1表达,同时增加p21的表达.