大豆GmWRKY35基因的克隆及其增强烟草耐旱能力研究

大豆易遭受干旱、盐、低温等非生物胁迫,严重导致产量下降.利用分子生物学技术提高作物抗性是作物育种的有效途径.锌指蛋白是植物中常见的重要转录因子,能够调控多种胁迫诱导基因的表达,有效提高综合抗性.在这项研究中,利用RT-PCR方法克隆大豆(Glycine max L.)GmWRKY35基因.其cDNA为1 500 bp,编码一个499个氨基酸的蛋白质,预测其分子量为54.89 kD,等电点(pI)为6.74.亚细胞定位分析表明,GmWRKY35定位于细胞核.实时荧光定量PCR分析显示,Gm WRKY35转录能被干旱诱导.把Gm WRKY35基因通过农杆菌介导转化烟草(Nicotiana tabacum L)中.在干旱胁迫下,与野生型烟草相比,转基因烟草植株表现出主根较长,叶子萎焉少,POD和SOD活性较高,MDA含量和电解质渗漏率较少.主要功能验证表明,Gm WRKY35基因在烟草中表达增强了干旱胁迫耐受性.这项研究表明大豆RING-H2型锌指蛋白在植物逆境中有重要作用,同时也为大豆抗性育种提供一个优良的候选基因.