抗菌肽对肝癌多药耐药细胞Bel-7402/ADM增殖和耐药性影响
Chinese Journal of Public Health（2019）
摘要
目的检测抗菌肽对耐药细胞Bel-7402/ADM增殖和耐药性的影响,为探讨抗菌肽在肝癌治疗方面的前景和应用价值提供参考依据。方法采用阿霉素浓度梯度递增法体外诱导建立人肝癌多药耐药细胞系Bel-7402/ADM,检测细胞对化疗药物的敏感性;提取家蝇幼虫抗菌肽,采用噻唑蓝比色法（MTT）检测抗菌肽对肝癌细胞的抑制作用,流式细胞仪检测抗菌肽对细胞周期分布和进入细胞内阿霉素浓度的影响,并采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测抗菌肽对Bel-7402/ADM细胞多药耐药基因MDR1表达的影响。结果建立了对阿霉素以及多种化疗药物均耐药的肝癌细胞系Bel-7402/ADM,Bel-7402/ADM对5–氟尿嘧啶、长春新碱、紫杉醇和阿霉素的耐药指数（RI）分别为15.94、8.45、8.11和10.96。抗菌肽对Bel-7402/ADM细胞的半数抑制浓度(IC50)为（463.67±16.93）μg/mL,低于对Bel-7402细胞IC50的（596.34±19.27）μg/mL（t=8.959,P <0.001）。抗菌肽作用后,Bel-7402和Bel-7402/ADM细胞均出现G0/G1期比例升高,S期比例下降;Bel-7402/ADM细胞对阿霉素的RI由10.96降至7.10,而Bel-7402细胞对阿霉素的敏感性无明显变化;Bel-7402/ADM细胞内阿霉素的平均荧光强度由（24.16±3.53）增高至（48.27±5.50）（t=6.390,P=0.003）,而Bel-7402细胞荧光强度增高不明显;Bel-7402/ADM细胞多药耐药基因1（MDR1）的相对表达量由（1.749±0.020）降至（1.071±0.044）（t=24.297,P <0.001）。结论肝癌多药耐药细胞Bel-7402/ADM对抗菌肽不耐药,且抗菌肽可逆转Bel-7402/ADM细胞的耐药性。
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