吗啡预处理对H9c2心肌细胞缺氧/复氧时microRNA表达的影响
Chinese Pharmacological Bulletin（2015）
Abstract
目的探讨吗啡预处理（morphine preconditioning,MPC）对H9c2心肌细胞缺氧/复氧（hypoxia reoxygenation,H/R）时microRNA（miRNA）表达的影响,为明确其机制提供参考。方法培养H9c2心肌细胞,随机分为3组（n=4）:1正常对照组（CON）:H9c2心肌细胞置于DMEM/F12细胞培养液常规培养;2缺氧/复氧组（H/R）:对心肌细胞行缺氧5h/复氧1h处理;3吗啡预处理组（MPC+H/R）:在H/R前,应用1μmol·L-1吗啡预处理10 min。处理结束后,采用CCK-8法检测细胞增殖、化学比色法检测细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）活性、Annexin-V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡、Western blot法检测细胞内Fas蛋白表达、荧光定量RT-PCR法检测细胞miRNA表达水平。结果与CON组比,H/R组细胞活力降低,LDH活性升高,细胞凋亡率增加,Fas蛋白水平升高（P<0.01）;MPC可明显提高细胞活力,降低LDH活性,抑制细胞凋亡,降低Fas蛋白水平（P<0.01）。qRT-PCR结果显示,与CON组相比,H/R组miR-133a-5p、miR-133b-5p、miR-664-1-5p、miR-6216和let-7e-5p表达明显下调,而MPC能明显地抑制H/R对这些miRNA表达的下调作用（P<0.01）。结论吗啡预处理减轻H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤可能与调控miR-133a-5p、miR-133b-5p、miR-664-1-5p、miR-6216和let7e-5p等miRNA表达有关。
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