ATP敏感性钾通道-Akt通路在硫化氢对抗高糖损伤H9c2心肌细胞中的作用
wf（2016）
Abstract
目的研究ATP敏感性钾通道（ATP-sensitive K+channel,KATP通道）-Akt通路在外源性硫化氢（hydrogen sulfide,H2S）对抗高糖引起的H9c2心肌细胞损伤中的作用。方法应用Western blot法检测心肌细胞Akt蛋白的表达水平;细胞计数盒测定心肌细胞存活率;Hoechst 33258核染色荧光显微镜照相测定凋亡细胞数量的变化;双氯荧光素染色荧光显微镜照相法检测胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平;JC-1染色荧光显微镜照相法测定线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential,MMP）。结果应用高糖(35 mmol·L-1,HG)处理H9c2心肌细胞024 h,其中3 h起磷酸化（p）-Akt蛋白表达水平开始明显下降,24 h p-Akt表达水平降至最低。在HG处理心肌细胞24 h前,应用50μmol·L-1KATP通道开放剂吡拉地尔（pinacidil,Pin）和400μmol·L-1硫氢化钠（NaHS,为H2S的供体）预处理30 min均能明显地抑制HG对p-Akt表达的下调作用。应用1mmol·L-1KATP通道阻断剂格列本脲（glibenclamide,Gli）预处理心肌细胞能阻断NaHS对HG下调p-Akt表达水平的抑制作用。此外,30μmol·L-1Akt的抑制剂LY294002能明显阻断NaHS对抗HG损伤心肌细胞的保护作用,表现为细胞存活率和MMP降低,凋亡细胞数量、ROS生成增多。结论 KATP通道-Akt通路介导H2S对抗高糖引起的心肌细胞损伤的保护作用。
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Key words
ATP敏感性钾通道,Akt通路,硫化氢,高血糖,损伤,心肌细胞,
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