骨形态蛋白9诱导干细胞骨向分化与环氧酶-2及PI3K/Akt的关系研究
Chinese Pharmacological Bulletin（2017）
Abstract
目的研究骨形态蛋白9（BMP9）诱导干细胞成骨分化过程中对PI3K/Akt信号的激活与环氧酶-2（COX-2）的关系。方法利用组织化学染色法、化学发光法或定量PCR检测碱性磷酸酶（ALP）的水平,Western blot检测骨桥素（OPN）、骨钙素（OCN）、COX-2、Akt1/2和磷酸化Akt1/2（pAkt1/2）水平,RT-PCR检测COX-2的表达,用免疫组化或免疫荧光分别检测COX-2的表达水平以及Akt1/2的磷酸化水平,用茜素红染色检测钙盐沉积。结果 BMP9在C2C12细胞中明显增加ALP活性,促进OPN和OCN表达以及钙盐沉积;BMP9对Akt1/2总蛋白无明显影响,能明显增加Akt1/2磷酸化水平,PI3K抑制剂呈浓度依赖性减弱BMP9诱导ALP活性增加。BMP9在C2C12细胞中促进COX-2表达,抑制COX-2明显减弱BMP9在C2C12细胞中诱导ALP活性增加和钙盐沉积的作用。外源性过表达COX-2促进BMP9诱导p-Akt1/2水平增加,而抑制COX-2则明显减弱BMP9诱导Akt1/2磷酸化水平增加。结论 BMP9在诱导干细胞成骨化过程中对PI3K/Akt信号的激活可能与其促进COX-2表达有关。
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Key words
bone morphogenetic protein 9,stem cell,osteogenic differentiation,osteogenic marker,PI3K/Akt,cycloxygenase 2
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