巨噬细胞来源的外泌体不同提取方法的比较

Piao-piao WANG,Hui-hui WANG,Dai-yin PENG,Shan-tang ZHANG, Wei-dong CHEN

Chinese Pharmacological Bulletin（2018）

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摘要

目的根据聚乙二醇（polyethylene glycol,PEG）沉淀原理,结合超高速离心改进一种简便、快速的细胞外泌体分离方法。方法采用超高速离心法、PEG6000沉淀结合超高速离心和EXO Quick试剂盒,分别提取巨噬细胞外泌体。通过透射电镜、NanoSight ZS及Nanoparticle tracker（NTA）分析外泌体的形态和粒径;蛋白印迹法鉴定细胞外泌体标志物Alix、TSG101的表达情况。结果 PEG6000沉淀结合超高速离心法获得的外泌体,其粒径分布和差速离心法相当,小于商品化的EXO Quick试剂盒。而外泌体表面蛋白Alix、TSG101在3种方法提取的沉淀物中都有表达。透射电镜结果显示,3种方法均获得典型的盘状囊泡。结论实验改进的细胞外泌体提取方法操作简洁、效率高,并且成本较低。

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关键词

macrophage,exosomes,Western blot,transmission electron microscopy,nanoparticle tracker,polyethylene glycol

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