SRC-1基因在小鼠神经干细胞分化过程中的变化

目的 观察类固醇受体辅助活化因子-1(SRC-1)基因在小鼠神经干细胞(NSCs)体外培养分化过程中表达的变化.方法 用机械分离和酶消化法从1～3 d小鼠大脑皮质获取NSCs原代细胞,体外培养获神经球,传代并消化,经血清诱导神经球细胞分化.形态学、细胞免疫荧光实验观察神经球形态、Nestin表达鉴定NSCs;抗体分别标记神经元、星形胶质细胞,检测细胞分化d 3、9的细胞类型.RT-qPCR和免疫印迹法检测细胞分化d 0、3、9 SRC-1基因mRNA和蛋白的表达.结果 新生小鼠大脑皮质获取的细胞,体外培养能扩增形成神经球,Nestin阳性表达.NSCs分化d 3主要为神经元,d 9主要为星形胶质细胞.与NSCs分化d 0相比,SRC-1表达在分化d 3明显升高,在分化d 9明显降低.结论 成功分离并获取新生小鼠皮质NSCs.在NSCs分化中,SRC-1表达量有明显变化,分布依次为神经元>NSCs>星形胶质细胞.