代谢相关酶过表达对CHO细胞瞬时表达anti-hLAG3的影响

为提高CHO细胞重组蛋白表达量,对比研究了过表达代谢相关酶丙酮酸羧化酶(PYC2)、苹果酸酶Ⅱ(MDH2)、丙氨酸转氨酶1(ALT1)、鸟氨酸转氨甲酰酶(OTC)、氨基甲酰磷酸合成酶Ⅰ(CPS Ⅰ)和代谢相关蛋白牛磺酸转运蛋白(TAUT)及透明颤菌血红蛋白(VHb)对ExpiCHO-S瞬时表达anti-hLAG3的影响.结果表明,过表达上述7种蛋白均能不同程度提高抗体产量.其中,过表达OTC、CPSⅠ、MDH2和PYC2分别能够使ExpiCHO-S抗体产量提高29.2％、27.6％、24.1％和20.3％.并且,过表达OTC和MDH2能够明显提高细胞培养初期的抗体生产速率,提前4d达到与对照组相近的抗体产量.过表达OTC和MDH2对anti-hLAG3对抗原的亲和力基本无影响.大多数情况下,7种蛋白对细胞生长基本无影响.此外,过表达MDH2和ALT1同样能够提高H293T细胞的抗体产量.总的来说,代谢相关蛋白的过表达可以应用于瞬时表达系统,提高哺乳动物细胞的抗体产量.