伪狂犬病病毒野毒株与疫苗株的实时荧光定量PCR鉴别方法的建立

针对伪狂犬病病毒疫苗株基因组缺失的3.5kb片段,设计3套引物和探针,并用标准的伪狂犬病病毒野毒株和疫苗毒株进行测试,建立了一种新的快速鉴别伪狂犬病病毒野毒株和疫苗株的实时荧光定量PCR方法.该方法的检测极限可达10 copies/μL,并与猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒和猪圆环病毒等不存在交叉反应现象,批内和批间重复性试验的变异系数分别为1.70％±1.07％和2.22％±1.02％,显示该方法具有良好的重复性.在对临床20份样品的检测时,该荧光定量PCR的阳性率为60％,普通PCR的阳性率仅为40％.结果表明,该方法具有特异性高、敏感性强的特点,是一种值得推广的快速诊断技术,可用于猪伪狂犬病的诊断和流行病学调查等.