H3N2犬流感病毒PB2 E627K突变对小鼠致病性的影响

甲型流感病毒PB2蛋白627位点突变(E627K)是影响流感病毒宿主适应性和致病性的重要因素之一.本实验室前期研究分离的H3N2亚型犬流感病毒(CIV) GD02株(A/canine/Guangdong/02/2011) PB2蛋白序列的627位点氨基酸为谷氨酸,为研究该病毒株PB2的E627K突变对小鼠致病性的影响,本实验采用反向遗传操作技术获得rGD02,并利用定点突变技术拯救了PB2 627位点发生突变的rGD02-E627K.通过接种小鼠比较rGD02和rGD02-E627K对小鼠致病性的差异,评价PB2 E627K突变对H3N2 CIV致病性的影响.结果显示,rGD02和rGD02-E627K对小鼠均无致死性(MLD50＞106 EID5o),对小鼠增重的影响差异均不显著,而且这两株病毒对小鼠的致病性也无明显差异.表明PB2 E627K并未显著影响H3N2 CIV对小鼠的致病性,该研究建立的H3N2 CIV反向遗传操作平台和定点突变技术为该病毒后续的致病机理、基因功能研究及疫苗研制奠定了基础.