胞内劳森菌的纳米PCR检测方法的建立
Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine（2016）
Abstract
为建立一种猪增生性肠炎(PPE)的快速诊断方法,本研究根据GenBank中已登录的胞内劳森菌(LI)基因组16S rDNA基因序列,设计1对引物,以疑似PPE的病料样品,通过PK-15细胞培养,分离到一株LI,建立了LI的纳米金PCR检测方法.结果表明该方法能够扩增得到与实验设计相符的202 bp (LI)的特异性片段;与大肠杆菌、沙门氏菌、流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒无交叉反应,特异性良好.与普通PCR法进行比较,该方法检测灵敏度比普通PCR高100倍.经临床检测,从50份病料样品中检出5份阳性样品,并且发现回肠粘膜和粪便中LI的检出率明显高于组织中LI的检出率.该方法可以用于LI的临床快速检测与流行病学调查.本研究为进一步研究LI的人工培养和实验室诊断PPE奠定了基础.
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Lawsonia intracellularis,porcine proliferative enteropenthy,detection,Nano-PCR
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