二乙烯三胺/一氧化氮聚合物诱导的奶牛乳腺上皮细胞损伤模型的建立

GUO Yongmei,ZHANG Boqi,SHI Huiyu,YAN Sumei?,SHI Binlin,GUO Xiaoyu

Chinese Journal of Animal Nutrition（2016）

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摘要

泌乳期间的奶牛由于代谢旺盛,往往会产生大量一氧化氮（NO）,诱导发生氧化应激,进而对细胞产生毒害作用。本试验旨在探讨二乙烯三胺/一氧化氮聚合物（DETA/NO）诱导奶牛乳腺上皮细胞（bovine mammary epithelial cells,BMEC）氧化应激的损伤条件,并建立氧化应激模型。本试验利用不同浓度（0、10、30、100、500、1 000μmol/L）的DETA/NO作为刺激源,作用BM EC 2、4、6、8、12、24 h,通过测定细胞存活率、抗氧化指标、炎症因子和NO含量及诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,i NOS）活性,筛选适宜的DETA/NO作用时间及作用浓度,建立BMEC氧化损伤模型。结果表明:1 000μmol/L的DETA/NO作用细胞6 h,细胞存活率降低为74.27%,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性也均显著降低（P<0.05）,然而,i NOS活性,NO、白细胞介素-1、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α、丙二醛含量则呈现相反的变化规律,显著升高（P<0.05）。综上所述,1 000μmol/L的DETA/NO处理细胞6h,可构建理想的BM EC氧化应激模型。

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关键词

bovine mammary epithelial cells,oxidative damage,diethylenetriamine/nitric oxide adduct

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