鸭甲肝病毒3型荧光定量PCR检测方法的建立及其在雏鸭体内分布规律

为研究鸭甲肝病毒3型(DHAV-3)在雏鸭体内的动态分布情况,本研究建立了检测DHAV-3的Taqman荧光定量PCR方法,该方法在107～102范围内有良好的线性关系,相关系数0.997,检测下限为22 copies/PCR.将200只2日龄雏鸭随机分为4组,依次对每组雏鸭肌肉注射0.2ELD50、2ELD50、20ELD50的DHAV-3(SD1201株)和生理盐水,并于感染后1、2、6、12、18、24、36、48、72、96 h从各组分别随机取3只雏鸭,应用荧光定量PCR方法对其心脏、肝脏、脾脏、肾脏、胸腺、法氏囊的病毒含量进行检测.结果表明,DHAV-3于感染后1h即可在3个试验组雏鸭肝脏中检测到,病毒含量为102～103 copies/g,2h后在心脏、脾脏、肾脏、胸腺和法氏囊中均检测到该病毒.各器官中的病毒含量于感染后36～48 h达到高峰期,至72 h病毒含量仍维持稳定.此外,在整个感染过程中,被检器官中的病毒含量与初始感染剂量呈正相关.本研究结果有助于阐明DHAV-3的致病机理.