GM-CSF通过JNK/c-Jun通路介导成纤维细胞MMP2/MMP9的表达

目的 探讨粒细胞单核巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)对人皮肤成纤维细胞表达基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9(MMP2/MMP9)的影响及其相关机制.方法 ELISA法和明胶酶谱检测不同GM-CSF浓度(0、10、50、100和500 ng/mL)刺激下成纤维细胞上清液内MMP2/MMP9的浓度及活性;Western blotting和real-time PCR分别用于检测GM-CSF或SP600125+GM-CSF处理组成纤维细胞后MMP2/MMP9/JNK/p-JNK/c-Jun/p-c-Jun的蛋白水平以及MMP2/MMP9的mRNA水平;ELISA法检测GM-CSF或SP600125+GM-CSF处理成纤维细胞不同时间(6、12、24和48 h)后细胞上清内MMP2/MMP9的浓度.结果 GM-CSF可以显著诱导人皮肤成纤维细胞MMP2/MMP9的表达与分泌(P＜0.05),且分泌的MMP2/MMP9浓度及活性与GM-CSF浓度呈正相关;GM-CSF处理成纤维细胞后,JNK及c-Jun蛋白的磷酸化水平和MMP2/MMP9的mRNA水平均高于对照组(P＜0.05),若经SP600125预处理,GM-CSF诱导的c-Jun磷酸化水平则显著被抑制(P＜0.05),且MMP2/MMP9的mRNA水平也明显降低(P＜0.05);GM-CSF诱导成纤维细胞MMP2/MMP9的表达在24 h时达到最高值,24 ～ 48 h逐渐降低(P＜0.05);若将SP600125与GM-CSF共处理成纤维细胞,MMP2的表达水平则显著低于对照组,MMP9的表达水平却略高于对照组.结论 GM-CSF能够通过活化JNK/c-Jun信号通路来诱导成纤维细胞MMP2/MMP9的表达和分泌.