circ_0001785与miR-330-5p在结直肠癌中的表达及其生物学意义
World Chinese Journal of Digestology(2020)
Abstract
背景 结直肠癌(colorectal cancer, CRC)发病机制尚未cular RNA,circRNA)在CRC等肿瘤中表达异常并可调控细胞增殖、迁移及侵袭等生物学过程,但关于其具体作用机制尚未完全阐明,因而探寻新型circRNA分子并探究其可能作用机制对进一步揭示CRC发病机制具有重要意义.目的 探讨circ_0001785与miR-330-5p在CRC中的表达及其生物学意义.方法 采用qRT-PCR法检测CRC组织、癌旁组织中circ_ 0001785、miR-330-5p的表达量;采用Pearson法检测CRC中circ_0001785与miR-330-5p的相关性;根据circ_0001785、miR-330-5p表达量的平均值将患者分为circ_0001785高表达组41例、circ_0001785低表达组39例与miR-330-5p高表达组45例、miR-330-5p低表达组35例,观察circ_0001785、miR-330-5p表达量与CRC患者临床病理参数的相关性;体外培养人CRC细胞SW480,分别将si-NC、si-circ_ 0001785、si-circ_ 0001785与anti-miR-NC、si-circ_ 0001785与anti-miR-330-5p转染至SW480细胞;采用qRT-PCR法检测细胞中circ_0001785、miR-330-5p的表达量;采用CCK-8法检测细胞增殖;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭;双荧光素酶报告实验检测circ_ 0001785与miR-330-5p的靶向关系;Western blot法检测MMP-2、MMP-9蛋白表达量.结果 circ_0001785在CRC组织及细胞系中表达水平显著升高(P<0.05),miR-330-5p的表达水平显著降低(P<0.05);circ_0001785与miR-330-5p呈负相关(r=-0.985,P<0.0001);circ_ 0001785、miR-330-5p表达量与分化程度、淋巴结转移及肿瘤分期密切相关(P<0.05);与si-NC组比较,si-circ_0001785组细胞活力及MMP-2、MMP-9蛋白水平显著降低(P<0.05),迁移及侵袭细胞数显著减少(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实circ_ 0001785可靶向结合miR-330-5p;下调miR-330-5p表达可降低干扰circ_0001785表达对CRC细胞SW480增殖、迁移及侵袭的作用.结论 circ_0001785在CRC中表达上调,而miR-330-5p表达下调,干扰circ_0001785表达可通过上调miR-330-5p的表达从而抑制CRC细胞增殖、迁移及侵袭.
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colorectal cancer,circ_0001785
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