猪圆环病毒2型CAP蛋白新型表位抗原肽的设计、合成及免疫原性研究

目的 设计合成PCV2 CAP的B细胞表位抗原肽并对其进行鉴定.方法 采用DNAStar和BcePred分析软件并结合吴玉章氨基酸抗原指数计算方法预测PCV2 CAP的B细胞表位,以此合成4分支多重抗原肽结构,同时串联一个通用型Th表位;采用Fmoc法合成4分支PCV2 CAP多重抗原肽(MAP),通过高效反相液相色谱(RP-HPLC)、质谱(MS)分析对其进行初步鉴定.以合成的抗原肽免疫昆明系小鼠及兔,观察体液免疫反应.结果 初步筛选出3种抗原指数较高的表位,即98～103aa(命名为B98),156～162aa(命名为B156),228～233aa(命名为B228);合成的多重抗原肽经RP-HPLC层析后,纯度达到92.49％,MS鉴定其相对分子质量一致,误差小于0.1％.以合成的MAP疫苗免疫小鼠及兔后,可产生高滴度的特异性抗PCV2CAP抗体.结论 PCV2CAP的B细胞新表位多重抗原肽有免疫原作用,将为PCV2CAP表位肽疫苗的研究奠定基础.