富含胞嘧啶单链DNA-银纳米簇荧光探针用于S1核酸酶的灵敏检测

以富含胞嘧啶(C)的单链DNA为模板合成银纳米簇, 将其作为功能化探针, 建立了一种无标记荧光检测S1核酸酶的方法.S1核酸酶可以特异性识别单链DNA, 在最适的酶催化反应条件下, 可将其降解为单核苷酸或寡核苷酸片段.当S1核酸酶不存在时, 富含C的单链DNA可以有效地合成荧光银纳米簇;当S1核酸酶存在时, 单链DNA模板被特异性识别并降解, 导致无法形成银纳米簇, 使体系荧光信号降低.实验结果表明, 银纳米簇的荧光强度随着S1核酸酶浓度的增加而降低.在优化的条件下, 体系荧光信号(F/F0)与S1核酸酶的浓度在5.0×10-5~4.0×10-3 U/μL范围内呈线性关系, 检出限为2.0×10-6 U/μL.该荧光探针选择性好, 可用于RPMI 1640细胞培养基中S1核酸酶的检测, 回收率达到91.8%~109.5%.