慢性乙型肝炎合并肝细胞癌患者乙型肝炎病毒X基因整合对锌指蛋白ZBTB20表达的影响

目的 探讨慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)合并肝细胞癌患者乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)X基因整合对锌指蛋白ZBTB20表达的影响.方法 选择2015年7月至2017年6月在台州恩泽医疗中心(集团)恩泽医院、台州市中心医院行手术治疗的18例CHB合并肝细胞癌患者,收集每例患者手术切除的标本,包括肝癌组织、癌旁组织和相对正常的肝组织.提取3种组织标本DNA,以HBVX和Alu为特殊引物,采用HBV-Alu-PCR扩增整合的HBVX片段和两侧的人类基因组DNA片段,扩增产物测序,计算目的片段整合情况.采用蛋白质印迹法检测锌指蛋白ZBTB20表达水平.统计学处理采用t检验、方差分析和x2检验.结果 18例CHB合并肝细胞癌患者的癌组织、癌旁组织、正常组织中检测到HBVX基因整合例数分别为13、16和9例,差异有统计学意义(x2=6.353,P=0.037).18例患者癌组织、癌旁组织、正常组织中锌指蛋白ZBTB20的表达分别为(50.14±11.25)％、(40.71±7.17)％和(39.06±5.17)％,差异有统计学意义(F=9.420,P＜0.01).5例患者的ZBTB20位点检测到HBVX基因整合,这5例患者癌组织、癌旁组织、正常组织中锌指蛋白ZBTB20的表达分别为(37.37±10.30)％、(32.06±2.61)％和(34.66±5.59)％;13例患者的ZBTB20位点未检测到HBVX基因整合,13例患者癌组织、癌旁组织、正常组织中锌指蛋白ZBTB20的表达分别为(55.06±7.06)％、(44.04±5.24)％和(40.76±4.04)％,有HBVX整合患者的ZBTB20表达水平均低于无整合患者,差异均有统计学意义(t=4.205、4.821、2.589,均P＜0.05).结论 CHB合并肝细胞癌患者的HBVX基因整合率在癌旁组织中高于肝癌组织,肝癌组织锌指蛋白ZBTB20表达水平高于癌旁组织,HBVX基因在ZBTB20位点上的整合可能导致ZBTB20表达下降.