不同流式细胞分析系统对外周血淋巴细胞亚群分析结果的影响

目的 探讨部分临床实验室FCM淋巴细胞亚群分析参考范围应用的合理性及不同生产厂家的流式细胞仪和试剂组合对淋巴细胞亚群分析结果的影响.方法 根据国内临床实验室常用的3个流式细胞仪型号(Beckman Coulter Epics XL、Beckman Coulter Cytomics FC500、BD FACS Calibur),分别选取3家北京地区临床流式细胞室(A、B、c室),按照各室的实际检测方案分别测定50份健康人静脉血标本,以验证各室淋巴细胞亚群分析参考范围是否合理.调查3家实验室室内全血质控品使用情况,并将商品化全血质控品分发各室,按照各自的实际实验方案在20个工作日内与常规标本平行处理、检测和分析.针对不同生产厂家的试剂,在同一流式细胞仪(型号为Beckman Coulter Epics XL)上用a、b、c、d 4种不同的试剂组合对20份患者标本进行检测,其中试剂组合a为美国Beckman Coulter公司同厂配套试剂和仪器,试剂组合b、c、d的检测结果分别与试剂组合a比较,计算b、c、d试剂组合偏倚>10%的概率.采用相同试剂和溶血素(美国Beckman Coulter公司)对24份患者标本进行前处理,分别在2台不同厂家和型号的流式细胞仪(型号为Beckman Coulter Epics XL和BD FACS Calibur)上检测,比较相同试剂处理标本后不同仪器对淋巴细胞亚群分析结果的影响.采用同厂配套试剂和仪器,比较Beckman Coulter Epics XL和BD FACS Calibur两个流式细胞检测系统对20份患者标本检测结果的影响.结果 A室的自然杀伤(NK)细胞及CD+4 T淋巴细胞/CD+8 T淋巴细胞(T4/T8),B、c两室的T4均有大于10%的结果落在相应的参考范围之外,超出相应参考范围的概率分别为16%(9/50)、24%(12/50)、22%(11/50)、12%(6/50).3家实验室20个工作日内的室内质控均在参考范围内.与试剂组合a比较,试剂组合b、c的所有项目偏倚均较大,其中偏倚>10%的概率最低为试剂组合b的T8,为70%(14/20);最高为试剂组合b、c的T淋巴细胞(T3)、T4,均达到100%(20/20).试剂组合d的T3、T8和B淋巴细胞(B)偏倚较大,偏倚>10%的概率分别为35%(7/20)、85%(17/20)、75%(15/20).不同生产厂家的试剂、仪器处理和分析标本的结果,与采用同一生产厂家的试剂、仪器处理和分析的结果相比,T3、T4、T8、B、NK均存在较大偏倚,偏倚>10%的概率分别为71%(17/24)、80%(19/24)、38%(9/24)、33%(8/24)、92%(22/24).Beckman Coulter Epics XL和BD FACS Calibur两个流式细胞检测系统相比较,T8、NK和B的偏倚均较大,偏倚>10%的概率分别为55%(11/20)、70%(14/20)、55%(11/20).结论 流式细胞实验室需要建立自己的参考范围并定期验证,以便合理进行调整.建议定期采用全血质控品,并累计质控数据.各实验室应选择同厂配套试剂处理标本.