应用表皮干细胞与去表皮的真皮体外构建组织工程皮肤

目的 用人皮肤表皮干细胞(ESCs)接种至同种去表皮的真皮上,体外构建组织工程皮肤.方法 用两步酶消化法分离获得角质形成细胞,并用Ⅳ型胶原快速粘附法筛选ESCs并培养;进行细胞形态学观察和用免疫组化法对ESCs进行鉴定;将ESCs接种至去表皮的真皮上浸没培养7d后转成气-液面培养,4周后取培养的组织工程皮肤切片分别做HE染色和角蛋白的免疫组化染色.结果 培养的ESCs呈铺路石样、克隆状生长;角蛋白K19和β1-整合素的免疫组化染色阳性.培养5周的组织工程皮肤可见有3～6层细胞,并可见角质层,表皮角蛋白染色阳性.结论 应用人皮肤的ESCs与去表皮的真皮可以体外构建组织工程皮肤.