微小RNA-181b通过调控第10号染色体缺失的磷酸酶表达影响肝癌细胞的增殖与凋亡

目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-181b通过调控人第10号染色体缺失的磷酸酶(PTEN)表达对HepG2肝癌细胞的增殖与凋亡的影响.方法 利用脂质体LipofectamineTM3000将miR-181b inhibitor和miR-181b NC转入HepG2细胞中,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR-181b表达,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,细胞克隆形成实验检测细胞克隆能力,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期,Real-time PCR法及Western blot法检测细胞中PTEN mRNA及蛋白表达水平,并进行荧光素酶报告基因分析.结果 miR-181b inhibitor组(0.23 ±0.02)中miR-181b表达量低于miR-181b NC组(1.00±0.01,P＜0.05);miR-181b inhibitor组细胞活力(0.37±0.03)低于miR-181b NC组(0.59±0.05,P＜0.05);miR-181b inhibitor组细胞克隆数目(37.64±3.70)低于miR-181 NC组(132.56±12.37,P＜0.05);miR-181b inhibitor组细胞早期凋亡率和晚期凋亡率均高于miR-181b NC组(P＜0.05).miR-181b inhibitor组细胞周期G1期高于miR-181 NC组(P＜0.05),miR-181b inhibitor组PTEN的mRNA及蛋白表达量均高于miR-181 NC组(P＜0.05),且荧光素酶报告基因结果证实PTEN是miR-181b下游靶蛋白.结论 miR-181b inhibitor通过负性调控PTEN表达抑制HepG2细胞增殖,并诱导细胞凋亡.