先天性巨结肠中HA117及SHH信号通路的表达及意义

目的 研究HA117及SHH信号通路(SHH、Ptch1、Gli1)在先天性巨结肠(Hirschsprung's disease,HD)中的表达情况,以探讨其与HD发生发展中的关系.方法 收集重庆医科大学附属儿童医院2014年至2015年经手术确诊为HD患儿的巨结肠组织标本30例,肠段分吻合段(正常对照组)、扩张段和痉挛段(实验组),运用实时荧光定量PCR (quantitative real-time PCR,qRT-PCR)、蛋白质印迹(Western blot)和免疫组织化学方法检测HA117、SHH信号途径在各段中的表达情况,对其进行定量和定性并比较.结果 qRT-PCR示痉挛段HA117mRNA表达水平为1.52±0.17,明显高于吻合段的0.28±0.04,差异具有统计学意义(P＜0.05).痉挛段SHH、Ptch1、Gli1mRNA表达水平分别为0.53±0.11、0.48±0.11、0.62±0.13,明显低于吻合段(1.23±0.26、1.20±0.22、1.71±0.46),差异具有统计学意义(P＜0.05);Western-Blot示SHH、Ptch1、Gli1蛋白相对表达水平与mRNA表达水平一致,差异均具有统计学意义(P＜0.05);免疫组织化学(DAB染色)结果提示:痉挛段SHH、Ptch1、Gli1染色明显弱于吻合段.结论 HA117及SHH信号通路可能与肠神经系统(ENS)发育有着密切的联系,这可能是HD病理发生的重要作用机制之一.