免疫磁珠富集与免疫层析一体化检测甲型流感病毒的研究

目的：以偶联甲型流感病毒单克隆抗体的免疫磁珠作为示踪标记物，利用免疫磁珠的分离、富集特性，建立免疫磁珠富集与免疫层析一体化的甲型流感病毒检测方法。方法以 EDC/NHS方法制备了免疫磁珠，采用双抗体夹心法和免疫层析技术，建立甲型流感病毒的磁珠免疫层析直接检测方法，并进一步将磁珠免疫层析直接检测法与免疫磁珠分离技术相结合建立一种新型的免疫磁珠富集与免疫层析一体化检测技术。通过检测甲型流感病毒感染的患者和正常人的临床咽拭子样本，与常规的胶体金免疫层析法进行比较来评价一体化检测方法的特异性、灵敏度及阳性符合率等指标。结果磁珠免疫层析直接检测方法与胶体金免疫层析法在特异性、灵敏度上大致相同，一般可以检出荧光定量PCR检测Ct值≤22的甲型流感病毒阳性样本，而一体化检测方法可以检出Ct值≤28的阳性样本，灵敏度得到明显提升。结论建立了检测甲型流感病毒抗原的免疫磁珠富集与免疫层析一体化检测技术，适用于临床现场快速检测。