微小RNA-410对人髓核细胞增殖及分泌表达的影响

目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-410对人髓核细胞增殖及分泌表达的影响.方法 实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测人髓核细胞转染miR-410 mimics后miR-410表达水平;转染后细胞培养12、24、48、72 h,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖;双荧光素酶报告基因检测miR-410与低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的靶标关系;Western blot检测聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、Ⅱ型胶原蛋白α1链(Col2A1)和HIF-1α的表达水平.结果 与scramble组比较,转染miR-410 mimics后miR-410的表达显著增加(0.85±0.12比2.74±0.34,P=0.015).CCK-8结果显示与scramble组比较,转染miR-410 mimics后细胞存活率逐渐增加,并存在时间依赖性,72 h时最显著(1.15 ±0.12比0.62±0.05,P=0.003);miR-410过表达使Aggrecan和Col2A1蛋白表达量显著上升(0.96±0.08比3.23 ±0.29,P=0.003;0.96 ±0.06比2.45 ±0.18,P=0.000).双荧光素酶报告基因检测结果表明miR-410与HIF-1α存在直接的靶标关系(0.32 ±0.15,P=0.000);miR-410过表达抑制HIF-1α蛋白表达水平(0.53 ±0.04,P=0.007).结论 miR-410过表达促进人髓核细胞增殖并增加Aggrecan和Col2A1表达,其机制可能与靶向抑制HIF-1 α表达有关.