白花丹醌对大细胞肺癌NL9980细胞的抗肿瘤作用及机制

目的 观察白花丹醌对大细胞肺癌NL9980细胞株的抗肿瘤作用,探讨白细胞介素-6/信号转导和转录激活因子3(IL-6/STAT3)信号通路在其抗肿瘤过程中的作用及机制.方法 采用不同浓度白花丹醌处理NL9980细胞株,噻唑蓝(MTT)法观察其对肿瘤细胞的抑制效果.采用简单随机抽样法设置白花丹醌不同浓度组(5.0、7.5、10.0 μmol/L)及空白对照组(不予白花丹醌处理),培养24 h后收集细胞.实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测IL-6和STAT3的mRNA表达.酶联免疫吸附试验(ELISA)法、Westem blot分别检测培养细胞上清液内IL-6蛋白表达和细胞内磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白表达.Real-time PCR检测通路下游调控基因B细胞淋巴瘤/白血病-2 (bcl-2)、血管内皮生长因子(VEGF)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的mRNA水平.结果 MTT法结果显示白花丹醌对大细胞肺癌NL9980细胞具有明显抑制作用,随药物浓度升高,抑制作用更为显著(F =32.17,P=0.000).与对照组比较,白花丹醌干预后各组IL-6和STAT3的mRNA及其蛋白表达量均减少.随着白花丹醌浓度增加,IL-6 mRNA(分别为0.50±0.02、0.44±0.1、0.34±0.04,F=173.067,P=0.000)及蛋白(分别为4.71 ±0.02、4.08 ±0.14、2.01 ±0.07,F=1 805.177,P =0.000)表达量降低;STAT3 mRNA(分别为0.86±0.08、0.72 ±0.03、0.52 ±0.06,F=230.918,P=0.000)及蛋白(分别为0.65 ±0.19、0.45 ±0.22、0.31 ±0.11,F=17.332,P=0.000)表达量随着白花丹醌浓度增加表达量明显降低,组间差异均有统计学意义.与对照组比较,白花丹醌处理组中通路下游基因bcl-2、VEGF、Cyclin D1的mRNA表达量均降低,且随药物浓度增加降低更加明显,差异有统计学意义(F=33.698,P=0.000;F=337.743,P=0.000;F=180.136,P=0.000).相关性分析结果表明IL-6和SATA3与bcl-2、VEGF、Cyclin D1均呈正相关.结论 白花丹醌对大细胞肺癌NL9980细胞株具有显著的抗肿瘤效果,其机制可能为通过抑制IL-6/STAT3信号通路及其下游基因表达发挥其抗肿瘤作用.