糖尿病创面与正常创面微小RNA差异表达谱分析

目的 探讨糖尿病大鼠与正常大鼠皮肤创面组织微小RNA(miRNAs)差异表达谱及其意义.方法 雄性SD大鼠,体质量200 ～ 250 g,链脲佐菌素一次性腹腔注射法建立糖尿病大鼠模型;4周后,取糖尿病成模大鼠及正常大鼠各6只,于背部制备全层皮肤切除创面;造模后3d,手术切取上述创面组织;用Trizol抽提总RNA并质检,纯化后进行荧光标记、芯片杂交,然后扫描得到杂交图片;利用软件提取数据并行差异分析;实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)验证芯片结果.结果 筛选出在糖尿病大鼠皮肤创面组织中上调的miRNAs有18个,下调65个.其中显著上调的miRNAs有mo-miR-496-5p、mo-miR-105、rno-miR-122-5p等;显著下调的miRNAs有rno-miR-196a-5p、mo-miR-134-5p、rno-miR-31-3p等.Real-time PCR的验证结果与芯片检测结果具有较好的一致性.功能富集分析显示差异表达明显的miR-31、miR-222、miR-449a等miRNAs分别参与有丝分裂原激活蛋白激酶(MAPK)、Wnt、Notch等与创面修复相关的京都基因和基因组百科全书(KEGG)信号通路.结论 糖尿病大鼠与正常大鼠皮肤创面组织中存在明显的miRNAs差异性表达,可能与糖尿病创面难愈合机制密切相关.