MicroRNA-143对白介素13诱导的人角质形成细胞组织激肽释放酶7表达的影响

目的 探讨microRNA-143 (miR-143)对白介素13(IL-13)诱导的人角质形成细胞组织激肽释放酶7(KLK7)表达的影响.方法 取对数生长期人皮肤原代角质形成细胞(NHEK),分别用0、2、10、50 μg/L IL-13处理24 h,或用50 μg/L IL-13分别处理0、6、12、24、48 h后,收集细胞,提取细胞总RNA,实时荧光定量PCR检测KLK7基因mRNA水平.再取部分NHEK,分为4组,即NHEK组(空白对照组,既不转染也不用IL-13刺激)、IL-13组(仅用50 μg/L IL-13处理)、miR-NC组(转染microRNA mimics阴性对照后用50 μg/L IL-13处理)和miR-143组(转染miR-143 mimics后用50 μg/LIL-13处理),IL-13处理24 h后,实时荧光定量PCR检测各组中KLK7 mRNA的相对表达水平,Western免疫印迹检测KLK7蛋白表达水平.结果 0、2、10、50 μg/L IL-13处理NHEK 24h后,KLK7 mRNA的相对表达水平分别为1.00±0.12、0.89±0.04、1.15±0.09和1.70±0.10,随着IL-13浓度的升高,KLK7mRNA相对表达水平有上升趋势(F=92.48,P＜0.05).50 μg/L IL-13分别处理NHEK 0、6、12、24、48 h后,KLK7 mRNA相对表达水平分别为1.00±0.05、1.05±0.12、1.71±0.20、1.97±0.19和2.48±0.13,随着IL-13处理时间延长,KLK7 mRNA的相对表达水平有上升趋势(F=206.44,P＜0.05).与miR-NC组KLK7的mRNA和蛋白相对表达水平相比,miR-143组均降低,差异有统计学意义(t值分别为6.76、4.23,均P＜0.05).结论 在人角质形成细胞中,IL-13上调KLK7的表达可能与miR-143的调控相关.