抗菌肽hCAP18在结肠癌患者血清中的表达及其临床应用价值

目的 探讨结肠癌患者血清中抗菌肽人类阳离子抗菌蛋白18 (hCAP18)水平的变化及其在结肠癌辅助诊断和预后中的价值.方法 采用病例对照研究.选择同济大学附属同济医院胃肠外科2014年1月至2015年6月结肠癌患者标本68例及同期体检科40名健康对照者进行研究,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中hCAP18的浓度,并比较结肠癌患者术前和术后血清中hCAP18的浓度变化情况;免疫组化检测结肠癌组织中的hCAP18的表达;采用溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)——酶联免疫吸附试验(ELISA)法和软琼脂克隆形成实验检测hCAP18对结肠癌细胞增殖能力的影响.通过分析受试者工作特征曲线(ROC)判断hCAP18浓度在结肠癌诊断中的敏感度、特异度.采用t检验和单因素方差分析等方法进行统计学分析.结果 血清hCAP18水平在结肠癌Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期患者中分别为(0.46 ±0.18) mg/L、(0.65 ±0.45) mg/L、(1.26 ±0.68)mg/L、(2.35±1.06) mg/L,均值为(1.16±0.88)mg/L;显著高于健康对照组的(0.19±0.07) mg/L,差异有统计学意义(t =5.290,P＜0.05);在结肠癌患者肿瘤切除后30 d血清中hCAP18的浓度为(0.26±0.06)mg/L,明显低于术前均值(1.16±0.88) mg/L,差异有统计学意义(t=3.971,P＜0.05);免疫组化结果显示与癌旁组织相比,结肠癌组织中hCAP18高表达;BrdU-ELISA法检测的结果显示,用浓度为0.05 ～1.00 mg/L的hCAP18在处理后,HCT116和SW480细胞的增殖能力明显增加;软琼脂克隆形成实验显示结肠癌细胞HCT116和SW480经1.00 mg/L hCAP18处理后,HCT116细胞克隆簇大小由(145.40±35.20) μm增加到(370.80±32.65) μm,差异有统计学意义(t=10.50,P＜0.05),数量分别由(8.50±2.30)个增加到(42.80±6.60)个,差异有统计学意义(t=3.945,P＜0.05);SW480细胞克隆簇的大小由(101.00±27.10) μm增加到(369.00±27.29) μm,差异有统计学意义(t=15.58,P＜0.05),数量分别由(6.20±1.70)个增加到(46.00±7.20)个,差异有统计学意义(t=4.775,P＜0.05);血清hCAP18检测结肠癌的ROC曲线下为0.93(95％ CI=0.859 ～0.999),对结肠癌诊断的敏感度和特异度分别达到91.17％和80.00％,优于结肠癌肿瘤标记物癌胚抗原(CEA)[0.78(95％口=0.699 ～0.933)]对结肠癌的辅助诊断效能,差异有统计学意义(t=4.519,P＜0.05).结论 血清hCAP18检测对结肠癌的辅助诊断具有良好的敏感度和特异度,有可能成为一项潜在的检测指标应用于结肠癌的无创诊断和病情检测;hCAP18能促进结肠癌细胞的增殖,在结肠癌的进展过程中扮演着重要的作用.