产前应用地塞米松对先天性膈疝大鼠模型胎肺发育及Wnt7b表达的影响

目的 研究产前应用地塞米松(Dex)对除草醚(Nitrofen)诱导的先天性膈疝(congenital diaphragmatic hernia,CDH)大鼠模型中胎肺发育及胎肺中Wnt7b表达的影响,探讨地塞米松改善CDH肺发育不良的可能机制.方法 采用数字随机法将12只孕鼠分为3组,利用Nitrofen诱导制作CDH胎鼠模型.其中,地塞米松组(CDH+ Dex组)与CDH组在孕第9.5天给予Nitrofen,前者产前应用地塞米松治疗,后者则不予地塞米松治疗,未作任何治疗的正常胎鼠为对照组.于孕21.5d行剖腹产,解剖胎鼠,取出胎肺.采用组织学检查方法评估各组胎肺的发育情况.采用实时荧光定量PCR方法检测各组胎肺中Wnt7b mRNA的表达情况.采用免疫组织化学方法检测各组胎肺中Wnt7b蛋白的表达情况.结果 成功构建CDH胎鼠模型.对照组胎肺发育较为成熟,CDH组胎肺发育明显滞后,CDH+ Dex组胎肺发育有所改善.对照组、CDH组和CDH+ Dex组的平均肺泡面积分别为(1 443.37±285.94)μm2、(332.83±72.19)μm2和(929.36±110.31)μm2;平均肺泡间隔厚度分别为(6.17±1.54)μm、(9.72±2.18)μm和(7.01±1.32)μm;肺血管数/HP分别为(7.20±0.91)个、(3.68±1.03)个和(6.84±0.78)个;管腔面积占血管总面积比分别为(38,74±4.94)％、(15.76±4.87)％和(37.12±7.03)％.与对照组相比,CDH组胎肺平均肺泡面积减少,平均肺泡间隔增厚,每高倍视野肺血管数减少,血管管腔狭窄,组间差异均有统计学意义(均P＜0.01);与CDH组相比,CDH+ Dex组胎肺平均肺泡面积增大,平均肺泡间隔厚度减小,每高倍视野肺血管数增加,血管管腔增大,组间差异亦有统计学意义(均P＜0.01).以21.5d胎龄的对照组胎肺作为对照样本,CDH组和CDH+ Dex组胎肺Wnt7b mRNA的相对表达量分别为1.58±0.19和0.72±0.15.CDH组胎肺的Wnt7b mRNA表达量比对照组升高,差异有统计学意义(P＜0.01);CDH+ Dex组胎肺的Wnt7bmRNA表达量较CDH组明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01).Wnt7b免疫阳性细胞主要分布在支气管和细支气管上皮.结论 产前应用地塞米松可明显改善CDH胎鼠肺发育不良,同时下调胎肺中Wnt7b mRNA的表达,推测地塞米松可能通过调节Wnt7b的表达来改善CDH肺发育不良.