咪喹莫特长期刺激诱发小鼠银屑病样皮损及骨丢失

目的 通过长期局部外用咪喹莫特诱导建立小鼠银屑病合并骨丢失模型.方法 12只10周龄昆明小鼠随机分为两组,实验组小鼠背部涂抹50 mg/d咪喹莫特乳膏,对照组涂抹等量凡士林软膏,每日观察背部皮肤表现.10周后处死小鼠,处死前观察小鼠皮肤红斑、鳞屑及皮损增厚情况,并记录银屑病面积和严重程度指数(PASI)评分,测量体重并取眼球血,处死后取背部皮损组织,HE染色观察组织学变化.取小鼠左侧胫骨,免疫组化染色观察骨组织中骨保护素(OPG)、破骨细胞分化因子(RANKL)表达分布情况,用微计算机断层扫描技术测定胫骨近端松质骨骨量及骨小梁体积比、数量、厚度、分离度和连接点密度.取小鼠左侧股骨做三点弯曲实验,检测其生物力学性能.ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子α、白细胞介素17的水平.提取小鼠右侧胫骨RNA,实时PCR分析OPG、RANKL mRNA的表达.用独立样本t检验比较两组间各指标的差异.结果 咪喹莫特局部刺激10周,可造成小鼠背部皮肤红斑、鳞屑、增厚等银屑病样炎症改变.实验组PASI评分为9.167±1.722,显著高于对照组(0,t=13.31,P<0.001).HE染色显示,实验组表皮棘层肥厚,表皮突延长,真皮浅层炎症细胞浸润,海绵水肿,血管扩张,毛囊增多.免疫组化染色显示,对照组和实验组OPG表达水平分别为3307.00±1158.72和16021.33±1954.61,RANKL分别为13644.67±4764.61和35433.33±1197.95,两组间差异均有统计学意义(t值分别为9.692、7.682,均P<0.01).微计算机断层扫描提示,实验组胫骨近端松质骨骨小梁体积比、骨小梁厚度显著低于对照组,骨小梁分离度显著高于对照组(P<0.01或P<0.05).两组股骨的弹性模量和断裂能量差异均无统计学意义(均P>0.05).两组血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素17水平差异亦无统计学意义(均P>0.05).实时PCR显示,实验组OPG mRNA和RNAKL mRNA表达水平均显著高于对照组(P<0.05和<0.01).结论长期外用咪喹莫特不仅可以造成小鼠皮肤发生银屑病样改变,同时可以间接导致银屑病小鼠胫骨近端松质骨骨丢失和微观结构退变,故可以通过长期应用咪喹莫特刺激小鼠构建银屑病合并骨丢失相关动物模型.