DDX46基因对结肠癌细胞电离辐射敏感性的影响及机制研究

目的 探讨DDX46基因对结肠癌细胞的电离辐射敏感性的影响及其作用机制.方法 DDX46基因RNA干扰慢病毒转染的SW480细胞为实验组,空载质粒慢病毒转染的SW480细胞为对照组.两组细胞转染72 h后,分别进行0和4 GyX射线照射,采用CCK-8方法检测两组的细胞活力;实验组联合4GyX射线照射24 h后,采用免疫荧光技术和Western blot法检测细胞γ-H2AX foci数量以及DNA损伤修复通路关键蛋白的表达水平,确定DDX46与辐射诱导的DNA损伤修复的关系.结果 4GyX射线照射24 h后,实验组的细胞活力比照射前降低(15.02±3.92)％(t=-4.696,P＜0.05),比对照组降低(17.43±1.83)％(t=4.844,P＜0.01);而对照组照射前后比较差异无统计学意义(P＞0.05).同时,实验组γ-H2AX foci数量相比于对照组增加了(43.03±17.6)％(t=-3.108,P＜0.05),ATM的蛋白水平显著升高(t=7.530,P＜0.01),而ATM的活性形式p-ATM以及ATM的下游靶蛋白Rad50的蛋白水平则明显降低(t=4.260、4.260、P＜0.05),同时γ-H2AX的蛋白表达水平也有一定程度的升高(t=-3.090,P＜0.05),DNA-PK在两组细胞内的蛋白水平变化不大.结论 沉默DDX46可以提高结肠癌细胞系SW480的辐射敏感性,其机制可能是DDX46表达沉默抑制结肠癌细胞系SW480中ATM的活化,从而抑制辐射诱导的DNA损伤的修复,提高SW480的辐射敏感性.