醉茄素A对肺鳞状细胞癌细胞上皮间质转化及凋亡的影响
Cancer Research and Clinic(2018)
摘要
目的 研究醉茄素A对肺鳞状细胞癌凋亡相关蛋白的调控作用以及对细胞上皮间质转化的影响.方法 体外培养肺鳞状细胞癌SK-MES-1细胞株.用终质量浓度分别为0(对照组)、5、10、20、40 μg/ml的醉茄素A处理SK-MES-1细胞24 h后,于倒置相差显微镜下观察细胞的一般形态结构、脱落情况等;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡率,细胞免疫荧光法和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测凋亡相关蛋白及基因bcl-2、bax的表达,以及E-cadherin和Vimentin的表达.结果 不同浓度(0、5、10、20、40μg/ml)的醉茄素A均能抑制SK-MES-1细胞活性,各组细胞活性分别为0.62±0.05、0.42±0.04、0.33±0.06、0.21±0.03、0.17±0.04,提示抑制作用与醉茄素A浓度相关(F=386.505,P=0.005).不同浓度(0、5、10、20、40 μg/ml)醉茄素A作用SK-MES-1细胞24 h后,各组细胞凋亡率分别为(0.180±0.011)%、(0.310±0.013)%、(0.500±0.021)%、(0.540±0.018)%、(0.410±0.027)%,提示醉茄素A很少引起细胞凋亡,多为坏死细胞(F=1 065.78,P=0.124);免疫荧光法结果提示不同浓度醉茄素A作用SK-MES-1细胞24 h后,20 μg/ml醉茄素A实验组Vimentin表达较对照组减弱,荧光强度较对照组降低;E-cadherin荧光强度较对照组增强;其余浓度实验组无明显变化;而bax、bcl-2蛋白在对照组及实验组中的相对表达强度无明显改变;RT-PCR结果显示在浓度为20、40 μg/ml醉茄素A组E-cadherin mRNA表达(6.7±0.6及6.4±0.9)较对照组(4.2±1.0)增加,且差异均有统计学意义(均P< 0.05),同时Vimentin mRNA相对表达(4.7±0.5及4.7±0.5)较对照组(7.2±0.7)减少,差异均有统计学意义(均P< 0.05).结论 醉茄素A能抑制肺鳞状细胞癌细胞的生长,并抑制其上皮间质转化过程,而与凋亡及凋亡相关蛋白无明显关系.
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关键词
Withaferin A,Squamous cell carcinoma,lung,Apoptosis,Epithelial-mesenchymal transition
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